德国品种的兔子是黑眼睛吗？尼日利亚西南部伊巴丹兔品种的氧化应激

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文 | 独言

编辑 | 独言

在尼日利亚西南部的兔子种群中，评估了勃艮第福夫、英国斑点兔和新西兰白兔的三种兔子的氧化状态，作为最佳生产力的生理适应指标。

从所有雄兔和使用标准程序获得的血清中收集血液样本，血清氧化应激指标测定包括使用标准程序测定的总抗氧化能力、脂质过氧化、超氧化物歧化酶、过氧化氢酶和谷胱甘肽过氧化物酶活性。

结果表明，兔种对血脂过氧化、总抗氧化活性、过氧化氢酶和谷胱甘肽过氧化物酶的影响不显著。勃艮第海兔、龙猫和新西兰白兔血清SOD活性有统计学意义相似，显著高于英国斑点兔血清SOD活性。这表明英国斑点在各品种中具有最少的超氧阴离子清除能力。

血液很容易经常受到外部环境的影响，包括饲养方式，环境温度，庇护所类型以及牛群管理的许多其他方面，因为它们与新陈代谢密切相关。活性氧是引起氧化应激的罪魁祸首，作为新陈代谢的一个组成部分，在体内不断产生。

当ROS的水平超过阈值时，可能会引起氧化应激；它们触发多不饱和脂肪酸的逐渐破坏，最终导致膜破坏。高反应性羟基自由基特别有毒，因为它可以与蛋白质，多糖，核酸和多不饱和脂肪酸反应并导致其结构和功能的改变。

人们普遍认为，线粒体呼吸是活性氧的主要来源，在正常状态下，消耗的氧气中有0.2%转化为超氧化物。 ROS的水平由生产和ROS降解和/或失活的速率决定，适当的平衡对于维持细胞稳态很重要。

虽然低水平的ROS在许多生化过程中是必不可少的，但ROS的积累可能会损害生物大分子，即脂质，蛋白质，碳水化合物和DNA。外部因素，如热，创伤，超声波，感染，辐射，毒素等，可导致自由基和其他ROS增加，并可能导致氧化应激。

氧化应激被认为在衰老和几种退行性疾病的发病机制中起着关键作用，如动脉粥样硬化，心血管疾病，2型糖尿病和癌症。

关于西非气候条件下兔子氧化应激指标的信息很少，记录尼日利亚兔子品种的氧化指标非常重要，特别是关于热舒适条件的报告，这可以作为解释、诊断和评估热带地区氧化应激的环境贡献的基线。

研究使用了四种外来品种的兔子，包括勃艮第之艮第，龙猫，英国斑点兔和新西兰白兔。在试验开始时，动物被确认健康状况良好，没有异常，符合品种和/或年龄组分类。

每个品种使用三十美元，动物被单独饲养，并以完全随机的设计随机分配到实验单元中。喂食动物体重的5%，日粮中粗蛋白17.05%，可消化能量2592.06千卡/千克，粗纤维10.02%，钙0.45%，磷0.21%。

还进行了兔子生产所需的其他例行程序和定期管理实践，该实验是在研究区域观察到最低温度湿度指数时进行的，该指数描述了研究区域中最高的热舒适度。

通过耳静脉将所有雄鹿的血液样品收集到普通样品瓶中，并将上清液分离为血清。使用分光光度法测定血清生化成分；使用商业检测试剂盒测定样品的总蛋白质、葡萄糖、总胆固醇、钠、氯化物、磷、镁和钾含量。

根据含有0.5 mL*********钠、0.2 mL H 的反应性混合物测定血清总抗氧化能力活性2O2，0.49毫升磷酸盐缓冲液，通过混合19.5毫升KH制备2采购订单4含80.5毫升钠2高原油4，然后将pH调节至7.4和0.2ml的Fe-EDTA复合物通过混合等体积的EDTA和硫酸亚铁铵新鲜制备，然后在25°C下放置60分钟。

将37微升血清加入后一种反应性混合物中，并在60°C下孵育1分钟。最后，加入20ml冰醋酸和0ml硫代*********酸，在100°C孵育10分钟后分光光度法测定<>nm处的吸光度。根据以下公式计算总抗氧化能力：其中 CUA （毫摩尔/升）、K：对照吸光度（K1 − K0）、A：样品的吸光度（A1 − A0）、UA：尿酸溶液的吸光度（UA1 − UA0）。

脂质过氧化测定；总体积为3.0ml的反应混合物含有1.0ml血清和1.0mlTCA；将所有试管置于沸水浴中45分钟。将试管移至冰浴中，然后以2500rpm离心10分钟；通过测量上清液在532nm处的光密度来评估每个样品中形成的丙二醛的量。

超氧化物歧化酶;2.1 ml 50 mM 缓冲液、0.02 ml 酶源和 0.86 ml 蒸馏水，用0.02ml 10mM邻苯三酚引发反应，并在420mm处监测吸光度的变化。一个单位的SOD定义为在50ml的标准测定系统中抑制邻苯三酚自动氧化3%所需的酶量，比活性表示为单位/分钟/毫克蛋白质。

谷胱甘肽过氧化物酶活性；0.5 ml 0.4 M 缓冲液，pH 7.0，0.2 ml 酶源，0.2 ml 2 mM GSH 和 0.1 ml 0.2 mM H2O2加入，并在室温下与含有除酶源以外的所有试剂的对照管一起孵育10分钟。

过氧化氢酶活性;检测系统包含 1.9 ml 0.05 M 缓冲液、pH 7.0 和 1.0 ml 0.059 M H2O2.通过加入0.1ml酶源引发反应。在1nm处以5分钟间隔240分钟监测吸光度的降低，活性表示为H的纳摩尔2O2分解/分钟/毫克蛋白质。

本研究获得的数据对一般线性过程的方差进行了单因素分析，以95%的置信水平检测到显着影响，并使用New Duncan对同一软件的多范围测试来分离均值。

所有评估参数均无显著影响，结果表明，血清生化指标不受品种差异的影响，表明不同品种的生理状态相似。

伊巴丹至少THI的四种兔子的血清脂质过氧化如图所示；脂质过氧化受兔种影响不显著；然而，英国斑点显然是品种中价值最高的；兔子的血清总抗氧化活性不受品种差异的显著影响。

显然，英国斑点在总抗氧化活性方面在该品种中具有最高的价值。

各品种血清超氧化物歧化酶活性差异显著，勃艮第海兔、龙猫和新西兰白兔血清SOD活性相似，显著高于英国斑点兔。

与其他品种相比，新西兰白兔的血清过氧化氢酶活性明显最高，但各品种间差异无统计学意义，血清谷胱甘肽过氧化物酶受兔品种影响不显著。

血清生化指标至少在温度湿度指数中进行评估，这表明热舒适性。结果表明，血清生化指标不受品种差异的影响，表明不同品种的生理状态相似。

这些动物只有一个变异源，环境条件表明研究区域的热舒适性。可以认为，在正常条件下，兔子品种在生理上具有相似性。

获得的值范围报告的值一致，并且报告的正常生化值范围内。

血浆葡萄糖的降低可能是由于葡萄糖利用率的增加，以产生更多的能量，以增加高呼吸活动所需的肌肉消耗和/或由于用水量的增加导致血液和体液整体的显着稀释。

新西兰白兔的血浆总蛋白、球蛋白、总脂质和胆固醇在夏季增加，这表明新西兰兔暴露在炎热的环境条件下可能会产生不良的生理影响。

血清总蛋白的减少可能是由于在热应激条件下发生的饲料氮摄入量减少，由于合成代谢激素分泌抑制而导致的蛋白质合成减少，和/或消耗水增加引起的血浆蛋白稀释。总脂质和胆固醇受季节影响。

在夏季，兔子和奶牛的胆固醇增加。他们将这些变化归因于不同季节甲状腺活动的变化，因为暴露于低环境温度会刺激甲状腺素的分泌；甲状腺激素刺激胆固醇合成以及从循环中去除胆固醇的肝脏机制。

胆固醇是性激素生物合成的前体；血浆胆固醇水平的下降可能是因为后期过程的速率超过了前者，并且血浆胆固醇水平在代谢率上升之前下降。

热应激期间的散热增强也可能导致电解质通过汗液、唾液、呼吸息肉和尿液流失，这可能导致血浆Na ，K 和Cl−浓度下降。

报告说，泌乳奶牛的热应激导致血清Na 和K 的明显损失，也报告了受热应激的奶牛血清电解质浓度的类似下降。

英国斑点兔显然在品种中具有最高的价值；这表明对自由基物种代谢物的抗氧化防御能力低，从而使动物易受到氧化应激。

同样，英国斑点在品种中总抗氧化活性值最高；这表明英国斑病中的脂质过氧化可能是由于动物血清中某些自由基物种代谢物清除剂的缺乏，但由于其全身清除剂的活性，其他底物的消除率很高。

脂质过氧化是不同自由基和代谢物共同作用的结果；消除某些自由基/代谢物可能不会减少其他活性自由基/代谢物的沉淀。总抗氧化活性测量作用于特定底物的酶促和非酶抗氧化剂的组合活性：超氧化物歧化酶、过氧化氢酶和谷胱甘肽过氧化物酶。

高总抗氧化剂活性可能是由于一种或多种成分抗氧化剂的活性。勃艮第野兔、龙猫兔和新西兰白兔血清SOD活性有统计学意义相似，高于英国斑点兔。这证实了早先关于英国斑点具有低超氧化物歧化酶阴离子清除能力的说法，并且超氧阴离子的积累是动物高脂质过氧化和随后氧化应激的原因。

英国斑点的过氧化氢酶和谷胱甘肽过氧化物酶活性相似，但值明显低于新西兰白，但高于龙猫和勃艮第福夫。

评估的兔子品种具有相似的氧化剂生成能力和抗氧化剂产生，除了英国斑点具有最少的超氧化物清除，这可能会增加该品种兔子中的氧化剂积累。

在基础条件下释放的绝大多数能量被细胞用于维持Na - K 依赖性ATP酶活性；这增加了ATP的使用，这些ATP与产生活性氧的氧化磷酸化途径的氧气消耗加剧有关