犬贾第鞭毛虫病能治好吗？宠物犬猫贾第鞭毛虫病诊断

摘 要 ：贾第鞭毛虫作为一种人畜共患寄生虫，严重危害着宠物犬猫的健康。论文从宠物犬猫贾第鞭毛虫病的感染症状、流行特点、诊断、治疗、预防等多个方面作了论述，指出要重视诊断方法以及药物的选择，尽早建立科学的治疗方案，增加犬猫的抗病能力，以期宠物犬猫饲养者能够加深对贾第虫病的理解和预判，从而更好的管理该病。

关键词 ：宠物犬猫；贾第鞭毛虫；诊断；治疗；预防

贾第鞭毛虫是可感染人、宠物犬猫等的重要人兽共患致病性寄生虫[1]。在分类学上贾第虫属于原生动物门（Protozoa）鞭毛虫总纲（Mastigophora）动物鞭毛虫纲Zoomastigophorea）双滴目（Diplomonadida）六鞭科（Hexamitidae）贾第属（Giardia）。根据显微镜下形态学差异、超微结构和宿主来源，目前将贾第虫分为6种：敏捷贾第虫（G. agilis）、苍鹭贾第虫（G.ardeae）和鹦鹉贾第虫（G. psittaci）、微小贾第虫（G. microti）、鼠贾第虫（G.muris）和蓝氏贾第鞭毛虫（G.lamblia）[2]。近年来，黑龙江省、四川省、河南省和上海市等省(市)都有犬猫贾第虫流行情况及感染的报道[3]。且犬贾第虫感染率比猫高，部分地区可高达25.20%[4],严重影响犬的生长发育。临床上猫的发病报道较少，但群饲的猫易感染贾第虫。猫由于群居环境不卫生，特别是粪便、水的污染等是导致猫感染贾第鞭毛虫病逐渐增多的主要原因[5]。

1感染症状

犬作为家养动物或实验动物，与人类关系密切，可作为贾第虫感染的储蓄宿主，具有传播感染的潜力[6-7]。绝大多数犬和猫感染后，粪便中虽有卵囊排出，但无特别明显的临床症状。少数成年犬感染后，呈短暂的间歇性腹泻或慢性腹泻，排出含大量泡沫样的稀便，且粪便恶臭，颜色暗淡或呈脂肪痢，精神沉郁，食欲减退，渐进性消瘦、以及贫血、呕吐，体温一般不高。剖检时可见肠道不同程度的溃疡、出血，小肠、大肠中亦可见虫体。仔犬窝内的交叉感染率较高，可达100%,症状也较重，表现为精神沉郁，并有里急后重及间歇性腹泻，粪便呈现灰色，并带有黏液和血液，且腹泻两天后开始出现脱水、消瘦等症状。猫感染后幼猫可见腹壁胀气，大便黄色糊状，肛门松弛，且会有被毛粗糙、偶有带血或果冻样稀便。成年猫几乎不呈现腹泻症状，但会成为潜在的带毒者。感染后粪便中往往会有虫体排出，如果有其他猫或者别的宠物食入粪便，或者污染了食物或饮水，则食入者就有可能感染贾第鞭毛虫。

2流行特点

在国外宠物犬猫贾第虫病研究中，发现欧洲8000多只犬样品和4000多只猫样品中，分别有24.8%和20.3%的样品呈贾第虫阳性， 6月龄以下的的犬和猫感染率高[8]。在德国，犬和猫感染此病的几率差不多是英国、西班牙、荷兰和意大利的两倍，比利时感染率更高。国内调查显示，犬贾第虫阳性率为4.5%-25.2%。幼龄犬更容易感染贾第虫的原因，可能与其免疫系统发育不完善有关[9,10,11]。雌性犬和雄性犬贾第虫阳性率无统计学意义（P<0.05）[12]。这一流行性的原因可能与猫个体免疫力、临床诊断手段和诊断技术的提升、猫的寿命增加等多种原因有关。因此，在对犬猫进行临诊时，发现急慢性腹泻，都应对其进行合理怀疑及检查，以免错过最佳治疗时间，增加感染其它动物的机会。

贾第鞭毛虫属于兼性厌氧真核生物，学者在对贾第虫超微结构的研究发现，贾第虫缺乏线粒体、过氧化物酶体、高尔基复合体等细胞器 [13-15]，但有细胞骨架[16]。生活史中包括滋养体和包囊两个阶段。滋养体为营养繁殖阶段，包囊为传播阶段[17]。贾第虫的传播以包囊为主，包囊随粪便排出体外后，会污染食物和水，在被犬猫食入后而感染。目前，牡蛎等贝类水产动物体内已发现有贾第虫的感染，犬猫生食或半生食这些水产动物也会感染。包囊在十二指肠内脱囊变成滋养体，在肠壁和胆囊中寄生并繁殖。犬的滋养体一般在小肠上段，猫则在小肠下段。滋养体在寄生和繁殖时，会引发肠炎。滋养体到达肠后端，形成包囊，随后随粪便排出体外。

贾第虫的致病机制尚不完全清楚，一般认为，患病犬猫发病情况与自身的免疫力和抵抗力、虫株毒力、饲养环境等多种影响因素有关。一旦出现严重感染，虫体寄生在肠道内，容易形成机械性阻塞。虫体滋养体通过吸盘吸附于肠黏膜上又会形成机械性刺激，出现炎性反应，对肠粘膜造成一定程度的损伤；虫体分泌物和代谢产物对肠黏膜、微绒毛也会产生不同的刺激，导致肠功能出现紊乱。贾第虫宿主的感染具有一定的特异性。温少芳等认为贾第虫可分为聚集体A、B、C、D、E五种[18]，且贾第虫株聚集体D为犬科动物特有的基因型，不会感染人和其它动物。齐萌等认为A和B群主要感染人，C和D群主要感染犬，E群主要感染有类动物（牛，羊，山羊，猪，马等），F群主要感染描，G群主要感染老鼠。A群有时也会感染猫[19]。

3诊断

目前，国家标准中并未列出蓝氏贾第鞭毛虫的检测方法[20-21]。近些年，犬猫贾第鞭毛虫的诊断主要采用病原学诊断、免疫学诊断、分子生物学等诊断方法。其中，直接镜检法、快速姬姆萨染色法和多重PCR方法在临床上均能快速检出贾第鞭毛虫，可用于贾第鞭毛虫病的快速诊断。

3.1病原学诊断

贾第鞭毛虫的形态学研究起步较晚。最初，研究者为了研究蓝氏贾第鞭毛虫的结构，采用直接镜检法或者快速姬姆萨染色法进行诊断。实时动态显微视频摄录技术也在跟踪和监测寄生虫方面能起到很大作用，可观察到滋养体和包囊的典型形态及运动方式。陈阳等[22]用改良 TYI- S- 33 培养基对滋养体进行培养，用透射电镜观察虫体的超微结构，结果观察到虫体的质膜、内质网、核膜、核质、核仁以及二联微管结构。

3.1.1直接镜检法诊断

粪便镜检是临床常用的简单可靠的诊断方法。通常是采集宠物犬猫的腹泻粪便，采用直接涂片法可以观察到滋养体。在犬猫患病急性或间断腹泻期间，粪便多呈水样或糊状，检查时为避免滋养体死亡应采集新鲜标本。送检的标本应注意保温，以确保滋养体保持一定的活力。在疾病的后期，假如粪便已基本成形时，为了检测包囊，一般可采用2%的碘液直接涂片法即可确诊。为了提高检出率，亦可采用相对密度1:18的硫酸锌浮聚或醛-醚浓集等方法，但在蔗糖或其他漂浮液中包囊会收缩变形影响鉴别。因为包囊是间断排出的，检查时可增加检查频率来提高检出率。相差显微镜有助于鉴别贾第虫滋养体和包囊。如果没有相差显微镜的话，在盖玻片边缘加一滴卢戈氏碘液，使滋养体和包囊着色，增加虫体内细胞核的反差，使之更容易鉴定。贾第虫包囊在无症状宿主的正常粪便中同样能够观察到。但也有少数病例虽然出现了临床症状，但容易造成漏检，在粪便中既找不包囊，也找不到滋养体，所以需要多次采集进行鉴定为宜。

3.1.2快速姬姆萨染色法诊断

采用此方法检查时，取待测粪便样本，置洁净离心管中，加人磷酸盐缓冲液稀释，混匀，室温静置 5min，取中上层液体做滴片，姬姆萨快速染色，动态显微镜观察结果[23]。也可利用内窥镜摘取粘膜组织，制作压片，固定，姬姆萨染色观察，可见鞭毛虫着紫色，肠上皮细胞呈粉红色。如果是剖检的宠物肠样本，可用新鲜配制的姬姆萨液，对样本中鲜活虫体进行快速染色，利用动态显微摄录，观察、记载虫体特征，随后进行鉴定。

3.2免疫学诊断方法

酶联免疫吸附试验（ELISA）。本法既可以检测抗体，也可以检测抗原，诊断阳性率高，但操作过程较为烦琐，且对荧光显微镜要求高；间接荧光抗体试验（IFA），是用荧光标记抗体方法进行检验[24]。对流免疫电泳（CIE）法，是通过检测粪内抗原进行确定，诊断可靠性较高。

3.3分子生物学诊断

生物素标记贾第虫滋养体全基因组DNA近年来已获得较大突破。邓国超等[25]研究了猫源贾第虫EF1α和GDH基因的扩增与分析，首次采用两组引物EF1-F、EF1-R和GDHeF、GDHiF、GDHiR通过普通PCR及套式PCR方法对两基因片段进行特异性扩增，为贾第虫分子学研究奠定了基础。张萍等[26]针对犬源贾第虫16S rRNA基因片段设计一对引物，建立了贾第虫DNA的SYBR GreenⅠreal-time PCR检测方法。顾有方等首先对粪样基因组DNA提取。按粪便 DNA提取试剂盒说明书操作。所得DNA溶50ul洗脱缓冲液(TB)中，并于20℃保存备用。然后采用基因的巢式PCR方法对所有粪样进行扩增，并对获得的阳性扩增产物进行测序和生物信息学分析，最后确定蓝氏贾第鞭毛虫的聚集体。李雅文等[27]应用PCR技术对广州市某宠物寄养所采集的一株D型犬源贾第虫和一株F型猫源贾第虫的核糖体IGS序列进行了扩增、克隆、测序，并建立了PCR检测方法。结果显示D型犬源贾第虫和F型猫源贾第虫的IGS序列存在多态性现象，种间差异明显。

李守杰 讲师 渭南职业技术学院