试管过程中影响胚胎着床因素,试管婴儿,人类着床前胚胎的发育
人体内受精通常发生在输卵管的壶腹部—峡部。合子完成原核融合受精后,合子染色体为二倍体,并经历一系列的卵裂,在4-8细胞阶段引起主要的胚胎基因组激活(EGA)。胚胎基因组激活后,约在受精后第3天,胚胎致密化形成桑葚胚,随后进入子宫。随后细胞继续分裂进一步发育成囊胚,囊胚由充满液体的囊胚腔和内细胞团(ICM)组成,后者被滋养外胚层(TE)细胞包围。ICM产生胚胎组织,TE最终形成胎盘和胚外组织。囊胚在子宫腔内停留2-3天,在此期间,囊胚从子宫分泌的营养物质中获得营养,体积略有增大。在受精后第6天,子宫分泌的酶溶解囊胚周围的透明带(ZP),促使着床开始。妊娠的成功依赖于着床过程中时间和地点的精密协调。
卵裂过程
人类卵子的受精部位一般位于输卵管近卵巢一端的壶腹部。第1次卵裂大约发生在受精后30小时,卵裂方式为经裂,受精卵分裂成两个相等大小的卵裂球。第2次卵裂在受精后40小时完成,产生4个等大的卵裂球。第3天胚胎发育到6-12个卵裂球,第4天胚胎卵裂成由16-32个细胞组成。通常把由32个卵裂球组成的早期胚胎称为桑葚胚。此后,胚胎的卵裂球不断增多,桑葚胚内部出现空腔,称为囊胚腔,部分液体进入其中。随着胚胎进一步发育,囊胚腔逐渐扩大,即进入囊胚阶段。在此过程中,卵裂球开始出现明显的分化,有部分卵裂球分化成可以形成胚体的内细胞团细胞,还有部分细胞会逐渐分化成形成胚外组织的滋养外胚层细胞。
人类胚胎早期卵裂的特点
1. 卵裂速度缓慢:哺乳动物的卵裂是比较缓慢的一种卵裂,一般完成一次卵裂需要12-24小时。卵裂速度可能与合子基因组激活及贮存在卵胞质中的母源性mRNA特性有关。哺乳动物的合子基因调控一般开始于2、4、8细胞期或16细胞期,人类胚胎一般发育到8细胞期就进入合子基因的调控状态,在合子基因参与对卵裂过程的调控时,细胞需要转录新的mRNA并进行翻译,这可能会导致卵裂有所延迟。
2. 卵裂球间具有独特的排列方式:受精卵存在贯穿动物极-极物极的极轴,动物极所在的位置是第二极体的位置。第一次卵裂的界面穿过或接近极轴,为经裂方式,受精卵均分成两个等大的卵裂球。第二次卵裂,其中的一个仍为经裂,另一个卵裂球的分裂面与极轴垂直,为纬裂方式。人类胚胎的这种卵裂方式又称为旋转卵裂。
3. 卵裂的不同步性:在早期胚胎发育阶段,不是所有的卵裂球都是同时发生卵裂的,卵裂的速度在不同卵裂球间往往存在差异,因此胚胎的细胞数并非成倍增加,而经常会出现卵裂球为奇数的情况。
卵裂球的致密化
哺乳动物受精卵经过三次卵裂之后,形成了具有8个卵裂球的胚胎。在8个卵裂球之前的胚胎中,各个卵裂球之间排列松散,而在8细胞后,卵裂球突然挤在一起,这种现象称为致密化现象。此时,卵裂球由圆形变得扁平,卵裂球之间的接触面增大,卵裂球之间形成了紧密连接和缝隙连接。致密化的形成,使得胚胎内部的卵裂球之间能很好地进行小分子和离子类物质的交换;同时,紧密连接阻断了胚胎内的卵裂球与外界环境之间的直接联系,创造了一个内部的微环境,为胚胎的进一步发育提供了结构基础。鼠和兔的致密化现象发生在8细胞阶段,而人和其他灵长类动物则在16细胞阶段发生致密化现象。滋养层和内细胞团的形成
高等哺乳动物8细胞前的胚胎中,各卵裂球在形态结构和发育潜能等方面都没有显著差异。而发生紧密化以后,形成了外层和内层的特异卵裂球,卵裂球的命运在此之后将发生重大变化。位于外层的卵裂球将会发育成滋养层细胞(TEs),这一部分未来将分化为支持胚胎发育的胚外组织,并在胎儿出生时被丢弃;而位于内层的卵裂球则会发育成内细胞团(ICM),这一部分最终将发育成动物的各种组织器官。滋养层细胞与内细胞团不仅在形态上存在差异,而且细胞内的蛋白质合成也有所不同。如果将4细胞期胚胎的单个卵裂球置于另一群卵裂球的外层,所有这些单个卵裂球都将形成滋养层细胞,说明致密化作用后卵裂球所处的位置决定了其发育命运。
囊胚形成及脱离透明带
小鼠胚胎发育到大约64细胞期时,内细胞团(约有10多个细胞)与滋养层细胞逐渐分开,相互之间不再有细胞交换。此时,滋养层细胞开始分泌液体,胚胎内细胞团与滋养层细胞之间形成囊胚腔。随着液体的不断分泌和胚胎的持续发育,囊胚腔也逐渐增大,随后内细胞团细胞被挤到滋层细胞球的一侧,即形成囊胚。当囊胚进入子宫后,通过在透明带上溶出一个小孔(是由位于细胞膜上的一种胰蛋白酶样的蛋白酶strypsin将透明带上的纤维基质消化形成的),再加上内部充满液体的囊胚腔所产生的膨胀压力,将囊胚从透明带中挤出,这个过程称为孵化。此后,滋养层细胞与子宫内膜细胞接触,胚胎就进入植入环节。
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