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实验动物的染毒途径和技术 CJTER杂志实验动物联盟超全的实验动物镇静

人气:473 ℃/2025-04-10 17:05:25

编辑的话:

规范的实验操作,最大限度的减少实验动物的疼痛和痛苦,

是对这些为人类疾病做出巨大贡献动物们的尊敬与保护。

善待实验动物,善待生命!

以下信息来源于北京大学实验动物中心

1目的:规范实验动物镇静剂、******剂和止痛剂的使用,以及实验动物安乐死方法,确保人道的处理动物。

2范围:根据国际实验动物管理评估与认证协会(AAALAC)要求,参考Laboratory Animal Anaesthesia 和AVMA Guidelines on Euthanasia推荐的动物安乐死方法制定本使用指南。

对于给药方式说明:IP----腹腔注射 SC----皮下注射 IM----肌肉注射 IV----静脉注射 PO----口服

3设备与材料:CO2气瓶;配带盖和各种动物品种大小的******诱导箱;******机;注射剂或吸入剂;适当规格的注射器和针;个人防护装备至少包括防护服、手套、帽子和口罩等

4.步骤:

4.1******规程

******时应认真检查所用的******/止痛剂的有效使用日期,不可以使用过期的药物。

从开始******到动物清醒必须对动物进行实时监护。******的动物会反应迟钝、无方向感,所以******时应将动物放置笼中或采取适当的措施防止动物造成损伤。动物完全******(完全失去意识)方可开始手术。

******期间应注意对动物采取适当的保温措施,如电热毯或红外线加热灯,防止动物体温降低。

4.2对******程度的检测

如果动物有翻身反应或对疼痛和刺激发生反应,如表现蠕动、移动、收回肢体,则手术必须延迟进行。

深度疼痛测试,用手指挤压动物的后肢脚趾,如果动物有反应如缩回后肢,则动物意识未完全消失;如果动物对测试无反应,则为无意识或意识消失,******达到手术要,可以开始手术。

外科手术开始时,动物应充分松弛、对疼痛刺激无反应、呼吸和心率正常。

4.3设施

在动物房或手术室实施******。但******时应尽量不要在其它动物听到、看见和闻到的区域进行。

4.4局部******

局麻是在小的非创伤性手术时,减轻动物痛苦而采取的措施。局麻的选择将取决于手术所需时间的长短、场所和动物品种。常用的局麻药有盐酸利多卡因和盐酸普鲁卡因。

4.5剂量计算

根据动物的体重,计算******药合适的给药剂量。

例如,用********* 安定******300g的大鼠

*********的剂量是75mg/kg,安定是5mg/kg

因此,0.300kg×75mg/kg=22.5mg*********

0.300kg×5mg/kg=1.5mg安定

4.6根据动物品种选择******药物、剂量和给药途径

吸入******剂(如异丙烷)所有品种的动物均适用。钢瓶中压缩CO2气体与氧气(50:50)混合至100%的CO2可以用于啮齿类动物短期吸入******剂。

4.7.1 CO2******

CO2诱导短暂的失去意识并适用于某些实验过程,如眼眶后静脉丛采血和一些注射。每次只******一只动物。

使用一个与氧气未混合的CO2相连的容器。打开气瓶的主要阀门,通过微调从而调整气体压力。把动物放进气体流动的容器并关上容器盖子。离开动物1-3/2分钟直到动物呼吸缓慢和无意识,从容器中取出动物开始实验。动物将维持20-30秒无意识状态。如果需要再******20秒,追加一次******剂量,不可以连续超过2次追加CO2******。动物在容器中不可以放置超过5/2分钟。

动物将完全恢复,动物一恢复意识就放回原笼中。

在动物放进容器前,通过往眼里滴一滴盐酸丙对卡因更有宜于眼眶后静脉丛采血。局麻可以使动物减少对操作的敏感性并延长动物失去意识的时间,动物大约10秒钟就失去意识。先于采血前眼睛用薄纸擦拭以除去残余的盐酸丙对卡因。

4.7.2 常用的镇静、******、止痛和安乐死推荐药物和方法

4.7.2.1小鼠的镇静、******、止痛和安乐死推荐药物和方法

4.7.2.1.1小鼠镇静剂和诱导******药物的选择

术前诱导******药物

剂量

给药方式

效果

阿托品

0.04 mg/kg

SC or IP

抗胆碱能作用;减少唾液,呼吸道分泌物,阻止血管迷走神经反射

安定

5 mg/kg

IP

轻微镇静作用;不能止痛

氟胺酮

0.1-0.3 ml/kg

IP

轻度镇静,中度止痛;

*********

100-200 mg/kg

IM

深度镇静,轻微止痛;缺乏肌肉松弛作用

4.7.2.1.2小鼠******药物的选择

注射用******剂

剂量

给药方式

******深度(轻度/外科******)

持续时间(min)

恢复时间(min)

*********﹠安定

100mg/kg﹠5mg/kg

IP

保定/******

20-30

60-120

丙泊酚

26mg/kg

IV

外科******

5-10

10-15

氟胺铜﹠安定

0.4ml/kg&5mg/kg

IP or IP

外科******

20-40

120-240

丙泊酚

26mg/kg(然后2-2.5mg/kg/min)

IV

外科******

1-12hours

10-15

异氟烷

0.41ml/minat 4L/min Fresh gas flow (使用浓度2%)

吸入

外科******

--

--

三溴乙醇(阿弗丁)

125-240 mg/kg(使用浓度0.25%)

IP

外科******

15-45

60-120

注: 100%阿佛丁(三溴乙醇 叔戊醇=1:1配成);使用时用生理盐水进行稀释使用。

异氟烷使用需要面罩。

4.7.2.1.3小鼠止痛药物的选择

止痛剂

剂量

给药方式

效果

效果持续时间

阿司匹林

120 mg/kg

PO

轻微止痛

-

************

0.05-0.1mg/kg

SC

中等止痛

8-12 Hours

卡洛芬

5 mg/kg

SC

中等止痛

24 Hours

美洛昔康

5 mg/kg

SC

中等止痛

24 Hours

4.7.2.1.4小鼠安乐死的药物和方法选择

药物或方法

剂量

试用动物

备注

戊*********钠

100-200 mg/kg

所有小鼠

可接受方法

CO2

----

成年小鼠

可接受方法;幼龄动物和新生动物需要延长时间

颈椎脱臼

----

所有小鼠

条件可接受;操作人员需要接受培训,并具备熟练的技术

4.7.2.2大鼠的镇静、******、止痛和安乐死推荐药物和方法

4.7.2.2.1大鼠镇静剂和诱导******药物的选择

术前诱导******药物

剂量

给药方式

效果

阿托品

0.05 mg/kg

SC or IP

抗胆碱能作用;减少唾液,呼吸道分泌物,阻止血管迷走神经反射

氟胺酮

0.2-0.5 ml/kg

IM

轻度/中度镇静,中度止痛;

安定

2.5-5 mg/kg

IP or IM

轻微镇静作用;不能止痛

*********

50-100 mg/kg

IP or IM

深度镇静,轻微止痛;缺乏肌肉松弛作用

4.7.2.2.2大鼠******药物的选择

注射用******剂

剂量

给药方式

******深度(轻度/外科******)

持续时间 min

恢复时间 min

*********﹠安定

75mg/kg﹠ 5mg/kg

IP

轻度******

20-30

120

丙泊酚

10 mg/kg

IV

外科******

5

10

氟胺铜﹠ 安定

0.6ml/kg﹠ 2.5mg/kg

IP or IP

外科******

20-40

120-240

丙泊酚

10-12mg/kg(然后0.5-1.0mg/kg/min)

IV

外科******

1-12 hours

10-15

异氟烷

0.41ml/min at 4L/min Fresh gas flow (使用浓度2%)

吸入

外科******

--

--

三溴乙醇(阿弗丁)

300 mg/kg

IP

外科******

10-20

45-90

注: 100%阿佛丁(三溴乙醇 叔戊醇=1:1配成);使用时用生理盐水进行稀释使用。

异氟烷使用需要面罩。

4.7.2.2.3大鼠止痛药物的选择

止痛剂

剂量

给药方式

效果

效果持续时间

阿司匹林

100 mg/kg

PO

中等止痛

-

卡洛芬

5 mg/kg

SC

中等止痛

24 Hours

美洛昔康

5 mg/kg

SC

中等止痛

24 Hours

************

0.01-0.05mg/kg

SC or IV

中等止痛

8-12 Hours

************

0.1-0.25mg/kg

PO

中等止痛

8-12 Hours

4.7.2.2.4大鼠安乐死的药物和方法选择

药物或方法

剂量

试用动物

备注

戊*********钠

100-200 mg/kg

所有大鼠

可接受方法

CO2

----

成年大鼠

可接受方法;幼龄动物和新生动物需要延长时间

颈椎脱臼

----

体重<200g

条件可接受;操作人员需要接受培训,并具备熟练的技术颈椎脱臼前需要进行******处理

4.7.2.3豚鼠的镇静、******、止痛和安乐死推荐药物和方法

4.7.2.3.1豚鼠镇静剂和诱导******药物的选择

术前诱导******药物

剂量

给药方式

效果

阿托品

0.05 mg/kg

SC

抗胆碱能作用;减少唾液,呼吸道分泌物,阻止血管迷走神经反射

安定

5 mg/kg

IP or IM

深度镇静作用

氟胺酮

1.0 ml/kg

IP or IM

中度镇静,中度止痛;

*********

100 mg/kg

IM

深度镇静,轻微止痛;缺乏肌肉松弛作用

4.7.2.3.2豚鼠******药物的选择

注射用******剂

剂量

给药方式

******深度(轻度/外科******)

持续时间 min

恢复时间 min

氟胺铜﹠ 安定

1.0ml/kg﹠ 2.5mg/kg

IP or IM﹠IP

外科******

45-60

120-180

氟胺铜﹠ 安定

1.0ml/kg/h﹠ 2mg/kg(每4小时)

IP ﹠IP

外科******

1-12 hours

120-180

*********﹠ 安定

100 mg/kg﹠ 5mg/kg

IM

保定/******

30-45

90-120

异氟烷

0.41ml/min at 4L/min Fresh gas flow (使用浓度2%)

吸入

外科******

--

--

注: 异氟烷使用需要面罩。

4.7.2.3.3豚鼠止痛药物的选择

止痛剂

剂量

给药方式

效果

效果持续时间

阿司匹林

87 mg/kg

PO

轻微止痛

-

卡洛芬

4 mg/kg

SC

中等止痛

24 Hours

************

0.01-0.05 mg/kg

SC or IP

中等止痛

大约8-12 Hours

4.7.2.3.4豚鼠安乐死的药物和方法选择

药物或方法

剂量

试用动物

备注

戊*********钠

100-200 mg/kg

所有豚鼠

可接受方法

CO2

----

成年豚鼠

可接受方法;幼龄动物和新生动物需要延长时间

4.7.2.4兔子的镇静、******、止痛和安乐死推荐药物和方法

4.7.2.4.1兔子镇静剂和诱导******药物的选择

术前诱导******药物

剂量

给药方式

效果

阿托品

0.05 mg/kg

IM

抗胆碱能作用;减少唾液,呼吸道分泌物,阻止血管迷走神经反射

安定

0.5-2 mg/kg

IP or IM or IV

由轻到重度镇静;不能止痛

氟胺酮

0.2-0.5 ml/kg

IM

轻到中度镇静,轻到深度止痛;

*********

25-50 mg/kg

IM

中度缓解镇静,中度止痛;缺乏肌肉松弛作用

4.7.2.4.2兔子******药物的选择

注射用******剂

剂量

给药方式

******深度(轻度/外科******)

持续时间 min

恢复时间 min

美索比妥

10-15mg/kg(使用浓度1%)

IV

外科******

4-5

5-10

丙泊酚

10 mg/kg

IV

轻度******

5-10

10-15

氟胺铜﹠ 安定

0.3ml/kg﹠ 1-2 mg/kg

IM ﹠ IV

外科******

20-40

60-120

氟胺铜﹠ 安定

0.1-0.3ml/kg/h﹠ 1mg/kg(每4 小时)

IV ﹠ IV

外科******

1-12 hours

60-120

异氟烷

0.41ml/min at 4L/min Fresh gas flow (使用浓度2%)

吸入

外科******

--

--

*********﹠ 安定

25 mg/kg﹠ 5mg/kg

IM ﹠IM

外科******

20-30

60-90

注: 异氟烷使用需要“Bain's回路”或者“Ayre's三通管”。

4.7.2.4.3兔子止痛药物的选择

止痛剂

剂量

给药方式

效果

效果持续时间

阿司匹林

100 mg/kg

PO

轻微止痛

不清晰

卡洛芬

4 mg/kg

SC

中等止痛

24 Hours

************

0.05-0.1mg/kg

SC or IP

中等止痛

8-12 Hours

4.7.2.4.4 兔子安乐死的药物和方法选择

药物或方法

剂量

试用动物

备注

戊*********钠

100-200 mg/kg

所有兔子

可接受方法

CO2

----

成年兔子

可接受方法;幼龄动物和新生动物需要延长时间

颈椎脱臼

----

体重<1 kg

条件可接受;操作人员需要接受培训,并具备熟练的技术(颈椎脱臼前需要进行******处理)

4.7.2.5犬的镇静、******、止痛和安乐死推荐药物和方法

4.7.2.5.1犬镇静剂和诱导******药物的选择

术前诱导******药物

剂量

给药方式

效果

阿托品

0.05 mg/kg

SC or IM

抗胆碱能作用;

美托咪啶

10-100ug/kg

SC or IM or IV

轻到深度镇静;轻到中度止痛

乙酰丙嗪

0.1-0.25 mg/kg

IM

轻到中度镇静作用

氟胺酮

0.1-0.2 ml/kg

IM

中度到深度镇静,中度止痛;

4.7.2.5.2犬******药物的选择

注射用******剂

剂量

给药方式

******深度(轻度/外科******)

持续时间 min

恢复时间min

丙泊酚

5-7.5 mg/kg

IV

外科******

5-10

15-30

丙泊酚

5-7.5mg/kg(然后0.2-0.4mg/kg/min)

IV

外科******

20-30

15-30

丙泊酚

5-7.5mg/kg(然后0.2-0.4mg/kg/min)

IV

外科******

1-12 hours

10-15

异氟烷

0.41ml/min at 4L/min Fresh gas flow (使用浓度2%)

吸入

外科******

--

--

*********﹠美托咪啶

2.5-7.5 mg/kg﹠ 40ug/kg

IM or IM

轻到中度******

30-45

60-120

注: 异氟烷使用需要“Bain's或者 MaGill回路”。

4.7.2.5.3犬止痛药物的选择

止痛剂

剂量

给药方式

效果

效果持续时间

卡洛芬

4 mg/kg

SC

中等止痛

24 Hours

美洛昔康

0.2 mg/kg

SC

中等止痛

24 Hours

************

0.005-0.02 mg/kg

SC or IP

中等止痛

8-12 Hours

4.7.2.5.4犬安乐死的药物和方法选择

药物或方法

剂量

试用动物

备注

戊*********钠

100-200 mg/kg

所有犬

可接受方法

CO2

----

成年犬

可接受方法;幼龄动物和新生动物需要延长时间

氯化钾联合其他******药

----

所有犬

条件可接受;操作人员需要接受培训,并具备熟练的技术(心内注射氯化钾前先进行******处理)

4.7.2.6小型猪的镇静、******、止痛和安乐死推荐药物和方法

4.7.2.6.1小型猪镇静剂和诱导******药物的选择

术前诱导******药物

剂量

给药方式

效果

阿托品

0.05 mg/kg

SC or IM

抗胆碱能作用;

安定

1-2 mg/kg

IM

轻到中度镇静作用;

*********

10-15 mg/kg

IM

镇静;保定

4.7.2.6.2小型猪******药物的选择

注射用 ******剂

剂量

给药方式

******深度(轻度/外科******)

持续时间 min

恢复时间 min

*********

10-15 mg/kg

IM

镇静;保定

20-30

60-120

丙泊酚

2.5-3.5 mg/kg

IV

外科******

5-10

15-30

丙泊酚

2.5-3.5mg/kg(然后0.1-0.2mg/kg/min)

IV

外科******

20-30

15-30

丙泊酚

2.5-3.5mg/kg(然后0.1-0.2mg/kg/min)

IV

外科******

1-12 hours

10-15

异氟烷

0.41ml/min at 4L/min Fresh gas flow (使用浓度2%)

吸入

外科******

--

--

*********﹠ 安定

10-15 mg/kg﹠ 0.5-2mg/kg

IM ﹠IM

保定/轻度******

20-30

60-90

注: 异氟烷使用需要“Bain's或者 MaGill回路”或者“循环系统”。

4.7.2.6.3小型猪止痛药物的选择

止痛剂

剂量

给药方式

效果

效果持续时间

卡洛芬

2-4 mg/kg

SC

中等止痛

24 Hours

************

0.01-0.05mg/kg

SC or IP

中等止痛

8-12 Hours

4.7.2.6.4小型猪安乐死的药物和方法选择

药物或方法

剂量

试用动物

备注

戊*********钠

100-200 mg/kg

所有小型猪

可接受方法

CO2

----

成年小型猪

可接受方法;幼龄动物和新生动物需要延长时间

氯化钾联合其他******药

----

所有小型猪

条件可接受;操作人员需要接受培训,并具备熟练的技术(心内注射氯化钾前先进行******处理)

打击头部

----

幼龄猪周龄

条件可接受;要求技术,充分保定,和适当的力量

4.7.2.7非人灵长类的镇静、******、止痛和安乐死推荐药物和方法

术前诱导******药物

剂量

给药方式

效果

阿托品

0.05 mg/kg

SC or IM

抗胆碱能作用;减少唾液,呼吸道分泌物,阻止血管迷走神经反射

安定

1 mg/kg

IM

轻到中度镇静

*********

5-25 mg/kg

IM

中度镇静;保定;轻微止痛;

4.7.2.7.1非人灵长类镇静剂和诱导******药物的选择

注射用******剂

剂量

给药方式

******深度(轻度/外科******)

持续时间 min

恢复时间 min

丙泊酚

7-8 mg/kg

IV

外科******

5-10

10-15

*********﹠ 美托咪啶

5 mg/kg﹠ 0.05mg/kg

IM ﹠IM

外科******

30-40

60-120

丙泊酚

7-8 mg/kg (然后0.3-0.6mg/kg/min)

IV

外科******

1-12 hours

10-15

异氟烷

0.41ml/min at 4L/min Fresh gas flow (使用浓度2%)

吸入

外科******

--

--

*********﹠ 安定

15 mg/kg﹠ 1mg/kg

IM ﹠IM

外科******

30-40

60-90

4.7.2.7.2非人灵长类******药物的选择

注射用******剂

剂量

给药方式

******深度(轻度/外科******)

持续时间 min

恢复时间 min

丙泊酚

7-8 mg/kg

IV

外科******

5-10

10-15

*********﹠ 美托咪啶

5 mg/kg﹠ 0.05mg/kg

IM ﹠IM

外科******

30-40

60-120

丙泊酚

7-8 mg/kg (然后0.3-0.6mg/kg/min)

IV

外科******

1-12 hours

10-15

异氟烷

0.41ml/min at 4L/min Fresh gas flow (使用浓度2%)

吸入

外科******

--

--

*********﹠ 安定

15 mg/kg﹠ 1mg/kg

IM ﹠IM

外科******

30-40

60-90

注: 异氟烷使用需要“Bain's回路或者 Ayre's三通管(体重<10 kg)”或者“MaGill回路(体重>10 kg)”。

4.7.2.7.3非人灵长类止痛药物的选择

止痛剂

剂量

给药方式

效果

效果持续时间

氟胺铜

0.3ml /kg

IM

良好止痛

-

卡洛芬

3-4 mg/kg

SC

中等止痛

24 Hours

美洛昔康

0.1-0.2 mg/kg

SC

中等止痛

24 Hours

************

0.005-0.01 mg/kg

IM or IV

中等止痛

8-12 Hours

******

1-2 mg/kg

SC or IM

中等止痛

4 Hours

4.7.2.7.4非人灵长类安乐死的药物和方法选择

药物或方法

剂量

试用动物

备注

戊*********钠

100-200 mg/kg

所有非人灵长类

可接受方法

吸入******CO2

----

成年非人灵长类

可接受方法;幼龄动物和新生动物需要延长时间

4.7.2.8鸟的镇静、******、止痛和安乐死推荐药物和方法

4.7.2.8.1鸟镇静剂和诱导******药物的选择

术前诱导******药物

剂量

给药方式

效果

*********(>1 kg)

15-20 mg/kg

IM

轻微止痛;保定

*********(<1 kg)

30-40 mg/kg

IM

轻微止痛;保定

4.7.2.8.2鸟******药物的选择

注射用******剂

剂量

给药方式

******深度(轻度/外科******)

持续时间 min

恢复时间 min

*********﹠ 安定

20-40 mg/kg﹠ 1-1.5mg/kg

IM ﹠IM

中等外科******

20-30

30-90

4.7.2.8.3鸟止痛药物的选择

止痛剂

剂量

给药方式

效果

效果持续时间

************

0.01-0.05mg/kg

IM

中等止痛

8-12 Hours

4.7.2.8.4鸟安乐死的药物和方法选择

药物或方法

剂量

试用动物

备注

戊*********钠

100-200 mg/kg

所有鸟

可接受方法

CO2

----

成年鸟

可接受方法;幼龄动物和新生动物需要延长时间

颈椎脱臼

----

所有鸟

条件可接受;操作人员需要接受培训,并具备熟练的技术(脱臼前进行******处理)

胸部压迫

----

小到中型鸟类

条件可接受;操作人员需要接受培训,并具备熟练的技术

4.7.2.9鱼的镇静、******、止痛和安乐死推荐药物和方法

4.7.2.9.1鱼镇镇静、******、止痛和诱导******药物的选择

注射用******剂

剂量

给药方式

******深度(轻度/外科******)

持续时间 min

恢复时间 min

MS222

25-300 mg/l

沉浸

外科******

盐酸苯佐卡因

25-100 mg/l

沉浸

外科******

2 分钟诱导

撤消后5分钟恢复

注:1.苯佐卡因配置:首先200 mg苯佐卡因 5 ml ******,进行溶解,再加入8 L 水配置成25ppm(25mg/l)的苯佐卡因。

2.小到中型鱼(金鱼和鲑鱼),MS222 浓度为100 mg/l。

4.7.2.9.2鱼安乐死的药物和方法选择

药物或方法

剂量

试用动物

备注

MS222

≧300 mg/l

所有鱼类

可接受方法

盐酸苯佐卡因

≧100 mg/l

成年鱼类

可接受方法

脑脊髓刺毁法

----

所有鱼类

条件可接受;操作人员需要接受培训,并具备熟练的技术

4.8保存记录

需要所有******程序的手写记录文件。记录应该包括但不仅局限于以下几点:

IACUC动物使用和管理方案编号

******日期、时间和负责人签字

品系和个体或动物组别标记

使用的******剂、止痛剂或镇静剂名称、剂量、给药途径和时间

如果需要在整个过程中监测生理参数(如心率、呼吸次数/节律、体温、粘膜色泽和足部的松弛度等)

4.9术后恢复

动物可与正处于恢复期的同一品系动物放在一个笼具中,也可单独放在一个饲养笼内,但不要与未******的动物放在一起,防止恢复期动物受伤。动物恢复期必须保温。当动物恢复正常活动时,可以与其它动物放回同一笼或一个动物房间。随后几天必须定时对动物进行观察保证不出现并发症。

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